發(fā)色底物系列知識(shí)分析

發(fā)色底物系列

首先人工合成可以被待測(cè)凝血活酶催化裂解的化合物，且化合物連接上產(chǎn)色物質(zhì)，在檢測(cè)過程中產(chǎn)色物質(zhì)可被解離下來，使被檢樣品中出現(xiàn)顏色變化，根據(jù)顏色變化可推算出被檢凝血活酶的活性。產(chǎn)色物質(zhì)一般選用連接對(duì)硝基苯胺（PNA)。游離的PNA呈黃色，其測(cè)定波長(zhǎng)選用405nm。在這一波長(zhǎng)下，其它物質(zhì)對(duì)光的吸收小于PNA對(duì)光吸收的1%。具體檢測(cè)方法即可采用動(dòng)態(tài)法、也可采用終點(diǎn)法。動(dòng)態(tài)法即是連續(xù)記錄樣品的吸光度變化，算出單位時(shí)間吸光度的變化量，并以每分鐘吸光度的變化來報(bào)告結(jié)果。終點(diǎn)法即是指在活性酶同產(chǎn)色物質(zhì)作用一段時(shí)間后，加入乙酸終止反應(yīng)，檢測(cè)此段時(shí)間內(nèi)吸光度的變化，進(jìn)而推算出待檢酶的活性。凝血儀上多數(shù)采用動(dòng)態(tài)法，因?yàn)樗冉K點(diǎn)法簡(jiǎn)單、結(jié)果更為準(zhǔn)確。其優(yōu)點(diǎn)主要表現(xiàn)在:

用酶學(xué)方法直接定量、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、重復(fù)性好、便于自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化、所需樣品量小。

發(fā)色底物S-2222 TM Xa因子的發(fā)色底物

Bz-IIe-Glu（γ-OR)-Gly-Arg-pNA•HCl

R = H（50％）和R = CH 3（50％）

分子量：741.3

S-2238 TM 凝血酶的發(fā)色底物

H-D-Phe-Pip-Arg-pNA•2HCl

分子量：625.6

S-2251 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發(fā)色底物

H-D-Val-Leu-Lys-pNA•2HCl

分子量：551.6

S-2288 TM t-PA和其他廣泛絲氨酸蛋白酶的顯色底物

H-D-Ile-Pro-Arg-pNA•2HCl

分子量：577.6

S-2302 TM 血漿激肽釋放酶和因子XIIa的發(fā)色底物

H-D-Pro-Phe-Arg-pNA•2HCl

分子量：611.6

S-2366 活化蛋白C和因子XIa的發(fā)色底物

pyroGlu-Pro-Arg-pNA•HCl

分子量：539.0

S-2403 TM 纖溶酶和鏈激酶激活的纖溶酶原的發(fā)色底物

pyroGlu-Phe-Lys-pNA•HCl

分子量：561.0

S-2765 Xa因子的發(fā)色底物

Z-D-Arg-Gly-Arg-pNA•2HCl

分子量：714.6